分子生物學(xué)技術(shù)在國(guó)內(nèi)防制蟲媒傳染病領(lǐng)域的應(yīng)用
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【摘要】 本文綜述了國(guó)內(nèi)近年來(lái),分子生物學(xué)技術(shù)在蟲媒病中蚊媒傳染病防制的應(yīng)用情況,以期為蚊媒傳
染病的防制、應(yīng)對(duì)突發(fā)公共衛(wèi)生事件中蚊媒傳染病的發(fā)生提供參考.
【關(guān)鍵詞】 分子生物學(xué)技術(shù);蟲媒;傳染病
蟲媒病是由節(jié)肢動(dòng)物攜帶病原體傳播的一組疾病.
1992年在國(guó)際蟲媒病毒中心登記的已達(dá)535種,其中128
種對(duì)人有致病性[1].我國(guó)法定報(bào)告的傳染病中,蟲媒病占
13種,蚊蟲作為媒介,除了傳播病毒性疾病外,還可傳播
寄生蟲病.這類疾病大都屬于自然疫源性疾病,有一定的
地域性和時(shí)間性,發(fā)病率低、死亡率高,主要通過(guò)媒介的
控制進(jìn)行防制[2].近年來(lái),隨著分子生物學(xué)技術(shù)的研究和
發(fā)展,在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,并取得了重大進(jìn)展,
作者就近年來(lái)分子生物學(xué)技術(shù)在蚊媒傳染病的診斷和防制
等方面的應(yīng)用綜述如下.
1 常用的分子生物學(xué)技術(shù)[3]
1·1 核酸分子雜交技術(shù)
核酸的分子雜交(molecular hybridization)它是利用核
酸分子的堿基互補(bǔ)原則,在特定的條件下,雙鏈解開成兩
條單鏈,與異源的DNA或RNA (單鏈)復(fù)性,若異源
DNA或RNA之間的某些區(qū)域有互補(bǔ)的堿基序列,則在復(fù)
性時(shí)可形成雜交的核酸分子.雜交的雙方是待測(cè)核酸序列
及探針.核酸探針可用放射性核素、生物素或其它活性物
質(zhì)標(biāo)記.根據(jù)其來(lái)源和性質(zhì)可分為cDNA探針、基因組探
針、寡核苷酸探針、RNA探針等.
分類:根據(jù)被測(cè)定的對(duì)象,分為Southern雜交和
Northern雜交;根據(jù)所用的方法,分為斑點(diǎn)(dot)雜交、
狹槽(slot)雜交和菌落原位雜交;根據(jù)環(huán)境條件:分為液
相雜交和固相雜交.
1·2 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction, PCR)
是以擬擴(kuò)增的DNA分子為模板,以一對(duì)分別與模板互
補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物,在DNA聚合酶的作用下,按照
半保留復(fù)制的機(jī)理沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合
成.通過(guò)不斷重復(fù)這一過(guò)程,可以使目的DNA片段得到擴(kuò)
增,同時(shí)新合成的DNA片段也可以作為模板,使DNA的
合成量呈指數(shù)型增長(zhǎng).
PCR各種應(yīng)用模式:兼并引物( degenerate primer)
pcr、套式引物(nested primer) pcr、復(fù)合pcr (multiplex
pcr)、反向pcr ( inverse pcr或reverse pcr)、不對(duì)稱pcr
(asymmetric pcr)、標(biāo)記pcr ( lp-pcr)和彩色pcr、加端
pcr、錨定pcr或固定pcr、玻片pcr、反轉(zhuǎn)錄pcr方法檢測(cè)
rna、定量pcr.
1·3 DNA芯片
基因芯片又稱DNA芯片(DNA chip)或DNA微陣列
(DNA microarray).是采用光導(dǎo)原位合成或顯微印刷等方
法將大量特定序列的探針?lè)肿用芗?、有序地固定于?jīng)過(guò)相
應(yīng)處理的載體上,然后加入標(biāo)記的待測(cè)樣品,進(jìn)行多元雜
交,通過(guò)雜交信號(hào)的強(qiáng)弱及分布,來(lái)分析目的分子的有無(wú)、
數(shù)量及序列,從而獲得受檢樣品的遺傳信.特點(diǎn):具有通
量大,并行性、微量化與自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn),但在實(shí)踐中其研
究成本較高;方法標(biāo)準(zhǔn)化不足;配套軟件不夠完善.
2 分子生物學(xué)技術(shù)在蟲媒病診斷的應(yīng)用
2·1 瘧疾
黃炳成等[4]用pBF2 DNA片斷,經(jīng)標(biāo)記后作探針,從
多種瘧原蟲DNA樣本中檢出惡性瘧原蟲.基因芯片在瘧原
蟲的研究?jī)?nèi)容還有瘧原蟲新基因發(fā)現(xiàn)[5]、轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)
絡(luò)[6]、瘧原蟲適應(yīng)人體宿主機(jī)制[7]、瘧原蟲比較基因組雜
交分析[8]、惡性瘧原蟲抗原變異分子機(jī)制[9]以及瘧原蟲攻
擊紅細(xì)胞機(jī)制[10]等.
2·2 絲蟲病
黃志彪等[11]運(yùn)用PCR技術(shù)檢測(cè)血液中的班氏絲蟲微
絲蚴,可檢出lOOul陽(yáng)性血樣中的l條班氏絲蟲微絲蚴;用
于檢測(cè)班氏絲蟲監(jiān)測(cè)點(diǎn)540份血液樣本結(jié)果均為陰性,鏡
檢血片結(jié)果亦為陰性.常規(guī)絲蟲檢測(cè)是在夜間采血,有資
料顯示[12], SsP/PCR擴(kuò)增系統(tǒng)可用于檢測(cè)班氏絲蟲病患
者血樣中的循環(huán)DNA,能用于周期性或夜間周期性絲蟲病
的日間血檢工作,從根本上改變了絲蟲病的診斷、監(jiān)測(cè)和
工作方式.
2·3 登革熱病
鄭夔等[13]應(yīng)用多重PCR技術(shù)快速鑒定4種血清型登
革病毒,并在同一反應(yīng)管中進(jìn)行多重PCR對(duì)登革病毒進(jìn)行
分型鑒定,證實(shí)了2004年在廣東發(fā)生的登革熱疫情為I型
登革病毒;也有報(bào)道應(yīng)用寡核苷酸芯片技術(shù)能同時(shí)確認(rèn)流
感和登革熱病毒[14].長(zhǎng)期受這種疾病困擾的地區(qū)將有望通
過(guò)這種技術(shù)的完善,獲得有效的治療和保護(hù).
()屬于蚊媒傳染病。
A.流行性乙型腦炎(日本腦炎)(正確答案)
B.西尼羅熱
C.瘧疾
D.中東呼吸綜合征(MERS)
正確答案:ABC
依據(jù):《口岸傳染病排查處置技術(shù)方案》
經(jīng)蚊子傳播的疾病多達(dá)80余種,主要有:
(1)流行性乙型腦炎:主要流行區(qū)在亞洲遠(yuǎn)東和東南亞地區(qū),我國(guó)華南,華北,東北地區(qū)可見,集中7,8,9三個(gè)月發(fā)病.它由病毒引起,經(jīng)蚊傳播,臨床上發(fā)病急,有高熱,意識(shí)障礙,驚厥,強(qiáng)直性痙攣和腦膜刺激征,重型患者病后往往有后遺癥.
(2)登革熱和登革出血熱:由登革病毒引起,經(jīng)蚊傳播的急性傳染病.登革熱以發(fā)熱,皮疹,肌肉和骨關(guān)節(jié)劇烈酸痛,淋巴結(jié)腫大,白細(xì)胞減少等為主要表現(xiàn),病死率低;登革出血熱以發(fā)熱,皮疹,出血,休克等為主要特征,病死率高.目前主要分布在我國(guó)南方沿海地區(qū),長(zhǎng)江以南為多.
(3)黃熱?。菏屈S熱病病毒所引起的急性傳染病,經(jīng)伊蚊傳播.主要流行于非洲和中南美洲,臨床特征有發(fā)熱,劇烈頭痛,黃疸,出血,蛋白尿.我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)本病.
(4)瘧疾:由按蚊傳播,是瘧原蟲傳播引起傳染病,夏季兩季多見,常年可發(fā)病,國(guó)內(nèi)多見于長(zhǎng)江流域及其以南地區(qū),可遍布全國(guó),北方地區(qū)發(fā)病較少.臨床表現(xiàn)為:間歇性寒戰(zhàn),高熱,出汗,脾腫大,貧血.臨床可分間日瘧疾,三日瘧疾,惡性瘧疾三型.其中惡性瘧疾可侵犯內(nèi)臟,預(yù)后不良.
(5)絲蟲?。和ㄟ^(guò)蚊蟲叮咬而傳播,在我國(guó)僅有斑氏及巴來(lái)絲蟲病流行,長(zhǎng)江以南地區(qū)流行.絲蟲寄生在淋巴組織,皮下組織或漿膜腔,引起淋巴管炎癥及阻塞,形成象皮腫,腹水等.臨床還有絲蟲熱,肺部嗜酸粒細(xì)胞浸潤(rùn)綜合征等.
(6)黑熱?。菏怯砂昨榷RФ鴤鞑サ?為內(nèi)臟利什曼原蟲引起的地方性傳染病.
因此,滅蚊避蚊是預(yù)防蚊媒傳染病的一項(xiàng)重要措施.
望采納
文章名稱:關(guān)于GIS技術(shù)蚊媒傳染病的信息
轉(zhuǎn)載源于:http://sd-ha.com/article42/dopsphc.html
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